Сухая среда DMEM с содержанием глюкозы не менее 4,5 г/л, без глутамина, без бикарбоната, с пируватом натрия, с HEPES
Представляет собой сухую смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и фенолового красного для приготовления раствора. В среду добавлен НЕРЕS в количестве 25 мМоль. Среда при этом имеет более высокую буферную ёмкость и долше поддерживает необходимый для культивирования клеток рН. Требует дополнительного введения бикарбоната натрия.
Среда используется для культивирования широкого спектра клеток животных и человека.
СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ:
- Для приготовления раствора, необходимо отмерить 90% от общего объёма воды для клеточных культур комнатной температуры. Осторожно перемешивая, медленно ввести предварительно подготовленную навеску сухой среды. Не нагревать, размешивать до полного растворения.
- Затем необходимо добавить навеску бикарбоната натрия и глутамина*.
- После полного растворения всех компонентов, необходимо измерить рН раствора. Показания рН должны быть на 0,2 единицы ниже рН готовой среды. Для корректировки рН используйте растворы 1Н HCl или 1Н NaOH культуральной чистоты.
- При достижении необходимого рН, довести раствор до конечного объёма, осторожно перемешать, измерить рН готовой среды**.
- После приготовления раствор подвергается стерилизующей фильтрации через фильтр с размером пор 0,2 мкм или 0,1 мкм. Асептически разливается в стерильную, герметичную тару. Готовый продукт следует хранить при температуре от +2 до +8 Со в сухом, защищённом от света месте.
- Для проведения стерильных работ вскрытие флакона проводить в асептических условиях. Перед применением, если этого не было сделано ранее, во флакон со средой необходимо добавить стерильный L-глутамин или аланил-глутамин.
* При длительном хранении глутамин в растворе деградирует, поэтому его можно добавлять стерильным, непосредственно перед применением среды. Или использовать стабильный аналог глутамина - аланил-глутамин (кат. № Ф102626 или Ф005).
** Обратите внимание: после фильтрации рН среды возрастает на 0,1-0,2 ед.
ФОРМА ВЫПУСКА: Препарат в виде порошка выпускается в зиплок пакетах или пластиковых банках.
СРОК ГОДНОСТИ: 3 года.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ: хранить при температуре от +2 до +8о С в сухом, защищённом от света месте. Транспортировать всеми видами крытого транспорта.
СОСТАВ:
| Наименование | мг/л |
| D-Ca-пантотенат | 4 |
| Холина хлорид | 4 |
| i-Инозитол | 7,2 |
| Никотинамид | 4 |
| Пиридоксин HCl | 4 |
| Рибофлавин | 0,4 |
| Тиамин HCl | 4 |
| Фолиевая кислота | 4 |
| NaCl | 4 750 |
| L-Цистин | 48,3 |
| L-Тирозин | 72,1 |
| KCl | 400 |
| MgSO4 х 7H2O | 200 |
| NaH2PO4 x H2O | 125 |
| Д-глюкоза | 4500 |
| CaCl2 | 200 |
| FeSO4 x 7H2O | 0,07 |
| Пируват натрия | 110 |
| L-Аргинин | 69,46 |
| Глицин | 30 |
| L-Гистидин | 31 |
| L-Изолейцин | 105 |
| L-Лейцин | 105 |
| L-Лизин HCl | 146 |
| L-Метионин | 30 |
| L-Фенилаланин | 66 |
| L-Серин | 42 |
| L-Треонин | 95 |
| L-Триптофан | 16 |
| L-Валин | 94 |
| Феноловый красный | 15 |
| HEPES | 5958 |
