Сухая среда DMEM/F-12, без глутамина, без бикарбоната
Представляет собой сухую смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и фенолового красного для приготовления раствора. Требует дополнительного введения бикарбоната натрия. Cреда DMEM/F-12 - это смесь питательных сред DMEM и F-12 в соотношении 1:1, но готовится из отдельных компонентов.
Среда используется для культивирования широкого спектра клеток животных и человека. Применяется для культивирования клеток поджелудочной железы. Может использоваться как основа для создания бессывороточных сред.
СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ:
- Для приготовления раствора, необходимо отмерить 90% от общего объёма воды для клеточных культур комнатной температуры. Осторожно перемешивая, медленно ввести предварительно подготовленную навеску сухой среды. Не нагревать, размешивать до полного растворения.
- Затем необходимо добавить навеску бикарбоната натрия и глутамина*.
- После полного растворения всех компонентов, необходимо измерить рН раствора. Показания рН должны быть на 0,2 единицы ниже рН готовой среды. Для корректировки рН используйте растворы 1Н HCl или 1Н NaOH культуральной чистоты.
- При достижении необходимого рН, довести раствор до конечного объёма, осторожно перемешать, измерить рН готовой среды**.
- После приготовления раствор подвергается стерилизующей фильтрации через фильтр с размером пор 0,2 мкм или 0,1 мкм. Асептически разливается в стерильную, герметичную тару. Готовый продукт следует хранить при температуре от +2 до +8 Со в сухом, защищённом от света месте.
- Для проведения стерильных работ вскрытие флакона проводить в асептических условиях. Перед применением, если этого не было сделано ранее, во флакон со средой необходимо добавить стерильный L-глутамин или аланил-глутамин.
* При длительном хранении глутамин в растворе деградирует, поэтому его можно добавлять стерильным, непосредственно перед применением среды. Или использовать стабильный аналог глутамина - аланил-глутамин (кат. № Ф102626 или Ф005).
** Обратите внимание: после фильтрации рН среды возрастает на 0,1-0,2 ед.
ФОРМА ВЫПУСКА: Препарат в виде порошка выпускается в зиплок пакетах или пластиковых банках.
СРОК ГОДНОСТИ: 3 года
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ: хранить при температуре от +2 до +8 °С в сухом, защищённом от света месте. Транспортировать всеми видами крытого транспорта.
СОСТАВ:
| Соли и добавки | мг/л |
| CaCl2 x 2H2O | 154,45 |
| CuSO4 x 5H2O | 0,0013 |
| Fe(NO3)3 x 9H2O | 0,05 |
| FeSO4 x 7H2O | 0,417 |
| KCl | 311,8 |
| MgCl2 | 28,64 |
| MgSO4 x 7H2O | 100 |
| NaCl | 6 995,5 |
| NaH2PO4 x H2O | 62,50 |
| Na2HPO4 | 71,02 |
| ZnSO4 x 7H2O | 0,43 |
| Гипоксантин | 2,045 |
| Липоевая кислота | 0,105 |
| Линолевая кислота | 0,042 |
| Путресцин 2HCl | 0,081 |
| Пируват натрия | 55 |
| Д-глюкоза | 3151 |
| Феноловый красный | 8,1 |
| Аминокислоты | |
| L-Аланин | 4,45 |
| L-Аргинин | 121,95 |
| L-Аспарагин H2O | 7,5 |
| L-Аспарагиновая кислота | 6,65 |
| L-Цистеин | 12,11 |
| L-Цистин | 24 |
| L-Тирозин | 38,4 |
| L-Глютаминовая кислота | 7,35 |
| Глицин | 18,75 |
| L-Гистидин | 23,3 |
| L-Изолейцин | 54,47 |
| L-Лейцин | 59,05 |
| L-Лизин HCl | 91,25 |
| L-Метионин | 17,24 |
| L-Фенилаланин | 35,48 |
| L-Пролин | 17,25 |
| L-Серин | 26,25 |
| L-Треонин | 53,45 |
| L-Триптофан | 9,02 |
| L-Валин | 52,85 |
| Витамины | |
| D-Ca-пантотенат | 2,24 |
| Холина хлорид | 8,98 |
| i-Инозитол | 12,6 |
| Никотинамид | 2,02 |
| Пиридоксин HCl | 2,03 |
| Рибофлавин | 0,219 |
| Тиамин HCl | 2,17 |
| Тимидин | 0,365 |
| В12 | 0,68 |
| D-биотин | 0,0035 |
| Фолиевая кислота | 2,65 |
