Сухая среда Гибрис-1-СНО без глутамина, HEPES, бикарбоната Na, на 10 л
Представляет собой однородный порошок, содержащий углеводы, инсулин, аминокислоты, витамины, ионы металлов и другие питательные компоненты. Не содержит антибиотиков, источников глутамина*, HEPES и фенолового красного. Не содержит антибиотиков, альбумина и продуктов гидролиза белков животной или растительной природы в качестве обогатителей.
Препарат: Порошок бело-кремового цвета.
Назначение: Среда ГибриС-1-CHO предназначена для суспензионного культивирования и продукции рекомбинантных белков клетками генно-инженерных линий CHO. Может использоваться для адаптации сывороточных культур к бессывороточным условиям.
Способ применения:
1. Сухую среду растворить в 90–95 % от конечного объёма ультраочищенной дистиллированной воды или воды для инъекций при температуре 20–30 °C путем перемешивания;
2. Через 10 минут довести pH до >9,00 раствором NaOH (2,0–2,5 М);
3. После полного растворения (15–25 минут) добавить 2,25 г NaHCO₃ на 1 л;
4. Через 15–20 минут скорректировать pH до ~7,3 раствором HCl (1,0–3,0 М);
5. При необходимости через 10–15 минут повторно скорректировать pH (до значения не выше 7,4). Довести объём до 100 %;
6. Провести стерилизующую фильтрацию через 0,2–0,22 мкм PES-фильтр (не использовать нитроцеллюлозные фильтры);
7. Перед использованием ввести источник глутамина (аланил-глутамин или свежеприготовленный глутамин), при необходимости – антибиотики, предшественники нуклеотидов и/или минорные компоненты.
Условия хранения: Хранить при температуре +2... +8 °C в защищённом от света месте. Не допускать попадания влаги внутрь упаковки. Перевозить всеми видами крытого транспорта.
Адаптация клеток: Линии CHO, культивируемые в сывороточных средах, требуют адаптации при переходе к бессывороточной среде. Возможна адаптация быстрым или ступенчатым способом. Адаптированные линии CHO-S могут использоваться без дополнительной адаптации при стартовой плотности 4,0–10,0 × 10⁵ кл/мл. Максимальные плотности достигаются на 3–4 сутки.
*При длительном хранении глутамин в растворе деградирует, поэтому его можно добавлять стерильным непосредственно перед применением среды. Также можно использовать стабильный аналог глутамина – аланил-глутамин (кат. № Ф102626 или Ф005).
