Среда ЭКО 1 «Спермопреп» предназначена для промывки и выделения подвижных сперматозоидов из нативной спермы методом флотации. Может применяться как среда для хранения жизнеспособных сперматозоидов перед инсеминацией и как среда для микроманипуляций со сперматозоидами в процедуре ИКСИ.
Среда ЭКО 1 «Спермопреп» используется во вспомогательных репродуктивных технологиях, предназначена к применению в лечебно-профилактических и научно-исследовательских учреждениях.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В состав среды ЭКО 1 «Спермопреп» входит вода очищенная, соли Эрла, глюкоза, лактат, пируват. Среда ЭКО 1 «Спермопреп» приготовлена на основе бикарбонатного буфера. Поскольку среда предусматривает работу как в условиях 5-6% СО2, так и на открытом воздухе, она стабилизирована HEPES. В состав среды входит человеческий сывороточный альбумин, протестированный на наличие поверхностного антигена гепатита В, на антитела к вирусам гепатита С, ВИЧ-1 ВИЧ-2, на антитела к возбудителю сифилиса. Среда ЭКО 1 «Спермопреп» может быть приготовлена как с добавлением антибиотиков и фенолового красного, так и без этих компонентов (по желанию заказчика).
Среда ЭКО 1 «Спермопреп» простерилизована фильтрованием через фильтры с размером пор 0,22 мкм.
ПРОТОКОЛ ПРИМЕНЕНИЯ
- Перед использованием приоткрытый флакон со средой выдерживают в атмосфере 5 - 6% СО2 при температуре 37 °С в течение 2 ч.
- После сбора спермы образцы выдерживают в течение 20 минут при комнатной температуре, затем их тщательно перемешивают. Если образец слишком вязкий, то допускается его пропускание через пипетку с узким кончиком или через шприц с насаженной иглой, либо перемешивание со ЭКО 1 «Спермопреп» в соотношении 1:1.
- После перемешивания концентрацию и жизнеспособность сперматозоидов оценивают под микроскопом.
- Переносят 0,5 мл спермы в пробирку, затем осторожно наслаивают 1 - 2 мл среды ЭКО 1 «Спермопреп», выдержанной в инкубаторе.
- Следует установить пробирки под наклоном 45° для того, чтобы увеличить поверхность соприкосновения спермы со средой. Пробирки помещают в СО2-инкубатор при температуре 37°С на 60 мин. В это время происходит перемещение активных жизнеспособных сперматозоидов в среду. Перемещение сперматозоидов в среду также может происходить и при комнатной температуре, в этом случае крышки пробирок должны быть плотно затянуты для предотвращения изменения рН.
- После инкубирования отбирают 0,5 мл супернатанта и оценивают концентрацию и жизнеспособность сперматозоидов. Если концентрация жизнеспособных сперматозоидов слишком мала, то отбирают следующие 0,5 мл и включают в образец.
- Если концентрация спермы нормальная, то к образцу добавляют 5 мл среды ЭКО 1 «Спермопреп», хорошо перемешивают, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 15 минут.
- Удаляют супернатант, осадок ресуспендируют в равном объеме уравновешенной среды ЭКО 1 «Спермопреп».
- Приготовленный образец спермы заворачивают в алюминиевую фольгу и хранят при комнатной температуре (22 °С) до инсеминации, примерно через 6 часов после забора ооцитов.
СРОК ГОДНОСТИ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ
Срок годности среды – 3 месяца с даты изготовления. Питательная среда с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Хранить и транспортировать при температуре от 2 до 8 °С в защищенном от света месте в соответствии с СП 3.3.2.1248-03. При несоблюдении условий хранения и транспортирования среда подлежит утилизации.
Не замораживать!
Неиспользованный остаток нагретой среды, не подлежит повторному нагреванию и использованию.
Продукт должен быть использован в течение 7 дней с момента первого вскрытия флакона.
