Краситель бисБензимид Хёхст 33342, 25 мг, Sigma-Aldrich

Представляет собой флуоресцентный краситель ДНК, специфически окрашивающий пару тимин-аденин (AT-богатые участки). Является мембранопроницаемым, малотоксичным ядерным контрастирующим веществом, испускающим голубую флуоресценцию при связывании с двухцепочечной ДНК. Молекулярная формула C₂₇H₂₈N₆O·3HCl·H₂O.

Препарат: Желтый порошок. Растворимость: 50 мг/мл в воде (прозрачный раствор), в фосфатном буфере выпадает в осадок. Раствор (50 мг/мл в воде) прозрачный или с легкой опалесценцией, цвет от желтого до коричневого.

Назначение: Используется для окрашивания ДНК, хромосом и ядер в клеточной биологии, гистологии и цитологии. Применяется для сортировки живых клеток по содержанию ДНК, проточной цитометрии (определение содержания ДНК), визуализации распределения хроматина в живых клетках, детекции включения BrdU в клетки, а также для изучения начальных стадий апоптоза и распределения клеточного цикла. Делящиеся или реплицирующиеся хромосомы не окрашиваются этим красителем.

Способ применения: Для приготовления стокового раствора растворить 50 мг порошка в 1 мл воды (конечная концентрация 50 мг/мл). Для окрашивания клеток развести стоковый раствор в культуральной среде или PBS до рабочей концентрации (обычно 0,5–10 мкг/мл). Инкубировать клетки в течение 15–30 мин при 37 °C или комнатной температуре, затем промыть и визуализировать с помощью флуоресцентного микроскопа (возбуждение 355 нм, эмиссия 465 нм для комплекса с ДНК) или проточного цитометра. Для проведения стерильных работ вскрытие флакона проводить в асептических условиях.

Условия хранения: Хранить при температуре –20 °C в плотно закрытой таре, защищенной от света. Водные растворы стабильны в течение 1 месяца при 2–8 °C в темноте. Транспортировать всеми видами крытого транспорта с соблюдением низкотемпературного режима.