Тест-набор «Хориокар-1» для кариотипирования клеток (окраска по Романовскому)
Представляет собой готовый набор реагентов для культивирования клеток ворсин хориона и приготовления препаратов метафазных хромосом плода с целью кариотипирования. Отличительной особенностью методики является проведение мацерации клеток в уксусной кислоте после стандартного этапа фиксации.
Состав набора:
- Тест-флаконы с питательной средой для аспирации ворсин и транспортировки – 2 фл. по 30 мл (стерильно);
- Тест-флаконы с питательной средой для отмывки ворсин – 2 фл. по 8 мл (стерильно);
- Тест-флаконы с питательной средой для инкубирования клеток – 2 фл. по 5 мл (стерильно);
- Колхицин – 1 фл. (0,5 мг);
- Цитрат натрия – 1 фл. (100 мг);
- Краситель Азур-Эозин по Романовскому – 1 фл. (10 мл);
-Пипетки – 2 шт. по 3 мл.
Назначение: Используется для инкубирования клеток ворсин хориона с целью приготовления «прямых» или «полупрямых» препаратов из спорадически делящихся клеток и последующего анализа метафазных (митотических) хромосом плода. Остановка митотического деления достигается воздействием колхицина, гипотоническая обработка – раствором цитрата натрия, окраска – красителем Азур-Эозин по Романовскому.
Способ применения: Биоматериал (ворсины хориона) помещают в среду для транспортировки (15–20 мл), затем отмывают и переносят в среду для инкубации. Инкубируют при 37 °C в течение 18–20 часов. Добавляют колхицин (30 мкл на флакон из раствора, приготовленного растворением 0,5 мг в 5 мл воды), выдерживают 2 часа. Проводят гипотоническую обработку 1 % раствором цитрата натрия (30 мин при 37 °C), затем фиксацию смесью метанол–уксусная кислота (3:1). Клетки мацерируют в 60 % уксусной кислоте на предметном стекле при 56–60 °C. Препараты окрашивают красителем Азур-Эозин по Романовскому по стандартной методике. Для проведения стерильных работ вскрытие флаконов проводить в асептических условиях.
Условия хранения: Хранить при температуре от –10 до –20 °C в защищенном от света месте.
