Среда «ГибриС-1-СНО» без глутамина, 500 мл, ПЭТ
Бессывороточная питательная среда для суспензионного культивирования клеток CHO (рекомбинантных клонов и линий), представляет собой растворенную в деионизированной воде смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и синтетических заменителей сыворотки, простерилизованную методом стерилизующей фильтрации (0,22 мкм). Не содержит продуктов гидролиза белков животного или растительного происхождения, источников глутамина и нуклеотидов. Содержит инсулин.
Препарат: Прозрачная жидкость желтоватого цвета без опалесценции и осадка. Специфическая активность (на биореакторной культуре суспензионной линии CHO-S при посадочной концентрации 5×10⁵ кл/мл на 4 сутки): время удвоения – 15,0 ч (при норме не более 26 ч). Антибиотиков не содержит. Глутамин в составе отсутствует.
Назначение: Предназначена для получения и высокоэффективного суспензионного культивирования клеток рекомбинантных клонов и линий CHO в биотехнологических процессах. Обеспечивает быструю адаптацию адгезионных сывороточных культур CHO к бессывороточным условиям суспензионного культивирования. Максимальная плотность жизнеспособных клеток для линии CHO-S достигает 0,8–1,6×10⁷ кл/мл на 3–5 сутки культивирования.
Способ применения:
- Вскрыть флакон в асептических условиях;
- Внести в среду селективные добавки и питательные компоненты, необходимые для роста и продукции рекомбинантных веществ (в зависимости от конкретной линии CHO);
- Для обеспечения роста клонов, нокаутных по дигидрофолатредуктазе (DHFR) или глутаминсинтетазе (GS), необходимо ввести в состав среды предшественники нуклеотидов в форме гипоксантина/тимидина (HT) или глутамина (аланил-глутамин);
- Разлить подготовленную среду в культуральные емкости или системы биореакторного культивирования;
- Осуществить пассаж клеток в конечной плотности 1,0–10,0×10⁵ кл/мл. Культивирование при 37 °C, 5–6 % CO₂, 115–135 об/мин;
- Для достижения высоких плотностей и продуктивности рекомендуется использование специальных подпиток – «Подкормка №1» и «Подкормка №5» (содержит инсулин). Перед использованием рекомендуется добавить глутамин в соответствии с рецептурой.
Условия хранения: Хранить и транспортировать в упаковке предприятия-изготовителя при температуре 2–8 °C вдали от источников тепла и света. Срок годности после вскрытия первичной упаковки – 1 месяц с даты вскрытия флакона. Транспортировать всеми видами крытого транспорта с соблюдением регламентированных условий.
