НАЗНАЧЕНИЕ
Среда ЭКО 1 «ПВП» с поливинилпирролидоном предназначена для фиксации сперматозоида перед введением в ооцит при проведении процедуры ИКСИ.
Среда ЭКО 1 «ПВП» используется во вспомогательных репродуктивных технологиях, предназначена к применению в лечебно-профилактических и научно-исследовательских учреждениях.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ИЗДЕЛИЯ
Основой среды ЭКО 1 «ПВП» является вода очищенная, соли Эрла, глюкоза, поливинилпирролидон. Среда ЭКО 1 «ПВП» стабилизирована HEPES. В состав среды входит человеческий сывороточный альбумин, протестированный на наличие поверхностного антигена гепатита В, на антитела к вирусам гепатита С, ВИЧ-1 ВИЧ-2, на антитела к возбудителю сифилиса.
Среда ЭКО 1 «ПВП» может быть приготовлена как с добавлением антибиотиков и фенолового красного, так и без этих компонентов (по желанию заказчика). Среда ЭКО 1 «ПВП» простерилизована фильтрованием через фильтры с размером пор 0,22 мкм.
ПРОТОКОЛ ПРИМЕНЕНИЯ
- Перед использованием закрытый флакон со средой нагревают до температуры 37 °С.
- В центр чашки Петри помещают каплю (10-15 мкл) среды ЭКО 1 «ПВП».
- В зависимости от количества ооцитов, которые будут использоваться в процедуре ИКСИ, в ту же чашку Петри помещают необходимое количество капель среды ЭКО 1 «ИКСИ», выдержанной в инкубаторе.
- Все капли со средой покрывают жидким парафиновым маслом, предварительно уравновешенным в атмосфере 5-6% СО2 при температуре 37°С в течение 12 ч.
- Перед использованием чашку Петри с каплями среды следует выдержать 30 минут в СО2-инкубатор при 37 °С.
- Вводят 2 мкл подготовленных и отмытых сперматозоидов в каплю со средой ЭКО 1 «ПВП». Поливинилпирролидон, содержащийся в этой среде, способствует замедлению движения сперматозоидов и облегчает фиксацию единичного сперматозоида в пипетке для инъекции.
- Фиксируют один сперматозоид с помощью инъекционной микропипетки. Инъекцию сперматозоида рекомендуется проводить в минимальном объеме среды ЭКО 1 «ПВП».
- Процедуру инъекции сперматозоида в ооцит производят внутри капель со средой ЭКО 1 «ИКСИ».
- Затем проводят фиксацию ооцита с помощью холдинг-пипетки. Важно зафиксировать ооцит таким образом, чтобы полярное тельце находилось в позиции на 6 или на 12 ч.
- Инъекционную микропипетку вводят в ооцит в положении на 3 ч. Для подтверждения прокола блестящей оболочки рекомендуется аспирировать часть цитоплазмы.
- Если пипетка проникла внутрь цитоплазмы, то сперматозоид с частью аспирированной цитоплазмы вводят внутрь ооцита.
- После введения сперматозоида подают давление в холдинг-пипетке и ооцит отсоединяется.
СРОК ГОДНОСТИ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ
Срок годности среды – 3 месяца со дня изготовления при условии соблюдения режима хранения.
Хранить и транспортировать в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8 °С в защищенном от света месте.
Не замораживать!
Неиспользованный остаток нагретой среды, не подлежит повторному нагреванию и использованию.
Продукт должен быть использован в течение 7 дней с момента первого вскрытия флакона.
Рекомендуется хранить среду с минимальным объёмом воздуха во флаконе.